跳到主要內容區塊
:::

QuantStudio 3 Real-Time PCR

Print
    聯絡人：唐維       資料來源：醫學研究科       聯絡資訊：twei@vghks.gov.tw       
    常規儀器｜分子生物分析設備
    QuantStudio 3 即時定量 PCR 系統
    Applied Biosystems QuantStudio 3 Real-Time PCR System 可用於即時定量 PCR、基因表現分析、 絕對定量、相對定量與基因分型，支援 SYBR Green 與 TaqMan 探針化學法，適合分子生物學與轉譯研究常規分析。
    Real-Time PCR qPCR SYBR Green / TaqMan QuantStudio 3 機器地點：教研部4F 401室
    Applied Biosystems QuantStudio 3 Real-Time PCR System
    QS3 Real-Time PCR System
    96-well 0.1 mL block 規格
    4-color OptiFlex 光學偵測系統
    3-zone VeriFlex 獨立溫控區
    3 類 絕對定量、相對定量、基因分型
    儀器簡介
    適用於核酸定量、基因表現與 SNP 分型等分子生物學分析。
    設備定位

    本設備為常規分子生物分析儀器，用於即時監測 PCR 反應過程中的螢光訊號， 可依實驗設計進行標準曲線定量、比較 Ct 相對定量及基因分型分析。

    核酸定量 基因表現 病原檢測 SNP 分型
    分析原理

    qPCR 於 PCR 擴增過程中同步偵測螢光訊號，透過 Ct / Cq 值反映初始模板量。 CT 值與初始濃度對數呈反向關係，並可依實驗類型進一步完成定量或分型分析。

    Ct / Cq Amplification Curve Threshold Exponential Phase
    基本資料
    使用者於預約前可先確認設備型號、位置與適用範圍。
    儀器名稱 QuantStudio 3 即時定量 PCR 系統
    英文名稱 Applied Biosystems QuantStudio 3 Real-Time PCR System
    型號 Applied Biosystems QuantStudio 3
    設備分類 常規儀器｜分子生物分析設備
    機器地點 教研部4F 401室
    Block 規格 96-well，0.1 mL block；使用耗材須為 real-time PCR 專用平蓋耗材。
    主要用途 即時定量 PCR、基因表現分析、病毒量或病原菌偵測、絕對定量、相對定量與基因分型。
    資料分析 使用 QuantStudio Design and Analysis Software 進行實驗設定、曲線檢查、Ct 值分析與結果匯出。
    主要特色
    兼具獨立操作、桌機軟體分析與多種 qPCR 應用模式。
    觸控式操作

    儀器具備觸控螢幕，可進行獨立操作、使用者帳號、校正、Run History 與抽屜控制。

    VeriFlex 溫控

    具 3 個可程式化獨立溫控區，可用於條件最佳化或同時執行不同 assays。

    OptiFlex 光學系統

    QuantStudio 3 為 4-color locked 光學配置，支援常見 qPCR 螢光偵測需求。

    SYBR Green

    適合基因表現篩選與一般 qPCR 應用，需搭配 melting curve 確認專一性。

    TaqMan Probe

    專一性較高，適用於基因表現、SNP、copy number 與 mutation detection 等應用。

    資料匯出

    實驗結束後可檢查 amplification curve、Ct 值與 QC，依需求匯出 PDF 或 Excel 檔。

    適用實驗類型
    可依研究目的選擇不同 plate setup 與分析模式。
    絕對定量 使用已知濃度標準品建立 standard curve，適合病毒量、病原菌偵測或目標核酸 copy number 定量。
    相對定量 使用 Comparative Ct / ΔΔCt 分析，透過 endogenous control 與 reference sample 比較目標基因表現差異。
    基因分型 適合 SNP 或基因型判讀，常見螢光搭配包含 FAM / VIC、ABY / JUN。
    SYBR Green 分析 需確認 melting curve，並以 NTC 檢查是否有 primer-dimer 或非專一性產物。
    TaqMan Assay 以 primer + probe 偵測目標序列，適合較高專一性與 multiplex 應用。
    基本操作流程
    上機前請確認耗材、軟體連線與 plate 設定。
    01
    開機與檢查

    建議順序為連接電腦、QS3 儀器、操作軟體，並確認螢幕與軟體連線狀態正常。

    02
    設定實驗檔案

    開啟 Design and Analysis Software，建立或開啟實驗檔，設定檢測模式與螢光探針參數。

    03
    裝載反應盤

    使用 0.1 mL 耗材，確認 8 連排需搭配 tray，96 孔盤則直接置於金屬盤上。

    04
    啟動與匯出

    點選 Start Run 啟動反應；實驗結束後檢查曲線與 Ct 值，依需求匯出結果。

    耗材與裝載注意事項
    耗材錯誤可能造成卡盤或儀器損傷，請務必確認規格。
    耗材限制
    • 需使用 real-time PCR 專用耗材。
    • 此機型為 0.1 mL block，務必使用 0.1 mL 之 8 連排或 96 孔盤。
    • 耗材需為平蓋，不可使用凸蓋。
    • 請勿在耗材上標籤或書寫，以免增加背景訊號。
    裝載方式
    • 8 連排需使用 tray。
    • 8 連排建議於第 1 與第 12 排放使用過耗材，再由中間往外直放待測樣品。
    • 96 孔盤不需使用 tray，直接置於金屬盤上即可。
    • 請注意 A1 在左上角，並避免分注時產生氣泡。
    軟體與資料分析
    依實驗類型選擇正確 analysis mode，以免影響 secondary analysis。
    軟體操作重點
    • 建立實驗時需確認檔名、機型規格與實驗類型。
    • 常用分析模式包含 Standard Curve、Comparative Ct 與 Genotyping。
    • 修改任何分析設定後，需重新點選 Analyze。
    • 絕對定量需檢查 standard curve、R² 與 PCR efficiency。
    資料保存方式
    • 可透過 Cloud、USB 或 Desktop 保存資料。
    • USB 建議使用 USB 2.0 / FAT32 格式。
    • 儀器內部檔案雖可累積多筆，仍建議定期清理以維持效能。
    • 實驗結束後可依需求匯出 PDF 或 Excel 檔。
    上機注意事項
    請依吊牌與教育訓練內容操作。
    開機順序 建議依序為連接的電腦、QS3 儀器、操作軟體；操作軟體最後開啟以利連線順暢。
    帳號資訊 電腦帳號選擇 INSTR-ADMIN，密碼同帳號。
    抽屜控制 只能透過儀器螢幕開關抽屜，不可手動推拉。
    封膜要求 使用 96 孔盤時，光學封膜需確實壓緊；可沿 well 邊刮緊並確認密封痕跡。
    關機 關機無特定順序；將樣品自機器中移除後，即可關閉電腦與儀器。
    操作文件
    上機前請先閱讀教育訓練資料與上機注意事項。
    PDF
    QuantStudio 3 教育訓練簡報

    內容包含 qPCR 原理、SYBR / TaqMan、實驗類型、試劑流程、儀器規格與資料分析。

    開啟文件
    PDF
    QuantStudio 3 上機注意事項

    內容包含開機順序、耗材規格、反應盤裝載、資料匯出與關機提醒。

    開啟文件
    :::