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Sorter

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    聯絡人:唐維       資料來源:臨床醫學研究科       聯絡資訊:twei@vghks.gov.tw       
    Cell Sorter

    四向流式細胞分選儀

    以流式細胞分析與靜電偏折分選技術,從複雜細胞混合物中辨識並分離特定細胞族群,可支援細胞表面標誌分析、螢光標記細胞篩選與後續培養或分子分析。

    Cell Sorting 四向分選 多色螢光分析 靜電偏折
    BD FACSAria III Cell Sorter
    儀器名稱 四向流式細胞分選儀
    英文名稱 Cell Sorter
    儀器型號 BD FACSAria III
    核心用途 特定細胞族群分選

    儀器功能與原理

    功能概述

    四向流式細胞分選儀可同時測量單一細胞或顆粒之物理與化學特性,包括細胞大小、顆粒性、內部結構與相對螢光強度。系統可依照光散射與螢光訊號判讀特定細胞族群,並進一步完成細胞分選。

    分選原理

    Cell Sorter 利用高頻振盪噴嘴將液流分裂為微小水滴,含有目標細胞的水滴會被賦予正電或負電,當通過高壓電場時,帶電水滴會依電荷方向偏折並導入指定收集管,完成目標細胞分離。

    設備規格摘要

    噴嘴尺寸(Nozzle Size)

    70 μm、85 μm、100 μm,可依細胞大小與分選需求選擇。

    雷射波長(Laser Wavelength)

    488 nm、561 nm、633 nm、375 nm。

    樣管座(Sample Tube Holder)

    支援 FALCON #2052 12×75 mm plastic tube 與 15 ml 離心管座。

    收集座(Collection Tube Holder)

    細胞收集座支援 FALCON #2052 12×75 mm plastic tube。

    應用範圍

    分析應用

    • 測定每個細胞的大小與細胞內顆粒多寡。
    • 分析 DNA 及 RNA 的含量。
    • 偵測細胞表面標誌。
    • 分析細胞膜上及胞內受體。

    分選應用

    • 分選單核性白血球 Monocytes。
    • 篩選轉染成功或經病毒感染之細胞。
    • 應用於細胞凋零 apoptosis 分析。
    • 應用於細胞毒殺力相關研究。

    分選流程摘要

    1

    樣本準備

    依實驗需求完成細胞染色、過濾與濃度調整,準備上機分析與分選。

    2

    訊號分析

    利用光散射與螢光訊號辨識目標細胞族群,建立 gating 策略。

    3

    水滴偏折

    目標細胞所在水滴被賦予電荷,通過高壓電場後依方向偏折。

    4

    收集細胞

    將目標細胞導入指定收集管,後續可進行培養、功能分析或分子實驗。

    操作注意事項

    樣本與分選品質

    • 上機前應確認細胞懸浮液均勻,避免明顯團塊造成管路阻塞。
    • 分選條件需依細胞大小、活性與目標族群比例調整。
    • 不同噴嘴尺寸會影響分選壓力、速度與細胞存活率。
    • 收集條件應依後續培養、RNA/DNA 分析或功能實驗需求設定。

    安全與資料紀錄

    • 涉及病毒感染、基因轉殖或特殊生物材料時,應依相關生物安全規範辦理。
    • 分選前應完成實驗設計、螢光補償與對照組準備。
    • 分選後建議保存 gating、補償設定與分選條件紀錄。
    • 完成操作後應依儀器規範進行管路清潔與關機流程。

    教學影片

    四向流式細胞分選儀理論教學

    介紹流式細胞分選基本原理、訊號判讀與細胞分選概念,供使用者於訓練前後參考。

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