使用規則
四向流式細胞分選儀(BD FASCAria Ⅲ,The Power of Greater Performance Cell Sorting)功能及原理:
流式細胞技術可同時測量並分析單一細胞或顆粒的多種物理或化學特性,包括該顆粒之大小、顆粒性、或其內部結構以及相對之螢光強度。Cell sorter 的設計原理即使用噴墨技術(ink-jet graphic printing)及小水滴的靜電偏折(electrostatic deflection)。利用細胞大小、光散射程度、細胞的表面受體等的特徵、甚至DNA 定量參數相關分析測量,從一個複雜的細胞混合體中鑑別細胞族群,再利用高頻率振盪的噴嘴(vibration of nozzle),將水柱(stream)在離orifice 固定的距離分裂(break-off)成小水滴(drop)。要篩選帶有目標細胞的小水滴可由 flow cytometer 給予水滴正電或負電,當通過高壓電場時,帶電的水滴則往與電壓相反的方向偏折而被導入收集管中,如此即可分選出特定的細胞種類以進行功能研究,進一步培養或是做其他的分析。
儀器設備內容:
1. 噴嘴(nozzle)尺寸:70μm、85μm、100μm
2. 雷射波長:488nm、561nm、633nm、375nm
3. 樣管座:FALCON #2052 12×75 mm plastic tube、15ml 離心管座
4. 細胞收集座:FALCON #2052 12×75 mm plastic tube
應用範圍:
1. 測定每個細胞的大小、細胞內顆粒的多寡
2. DNA 及 RNA 的含量
3. 細胞表面標誌
4. 細胞膜上及胞內受體
5. 分選單核性白血球 (Monocytes)
6. 篩選出已被轉染成功或經病毒感染之細胞
7. 細胞凋零(apoptosis)、細胞毒殺力